6月27日晚9点，美国东部时间，拜登与特朗普在亚特兰大CNN演播厅进行了历史性的辩论，议题涵盖美国经济、堕胎、移民、国际冲突、种族、气候等多个领域。辩论历时约90分钟，特朗普展现出多样“微表情”，而拜登则多保持严肃，仅在谈及儿子时情绪激动。特朗普发言响亮清晰，相比之下，拜登语速缓慢，声音略带沙哑，偶尔重复词语，据悉是因为近期感冒所致。

辩论中，特朗普未承诺禁止堕胎药，主张堕胎权归属各州；拜登则批判此观点，强调特殊情况下的不合理性。关于移民，两人针锋相对，特朗普重申其强硬立场及任内边境安全成就，拜登则批评其分离家庭的政策非人道。

特朗普对拜登儿子的言辞攻击成为辩论高潮，拜登不仅引用媒体报道反驳特朗普对军人的不敬言论，还为阵亡和参战的儿子辩护，直斥特朗普为“失败者”。特朗普否认并试图转移至亨特·拜登的话题，未获拜登认同。

辩论期间，拜登的健康状况和表现引发关注，部分民主党人士对其表现表示深切忧虑，认为近乎“灾难”，甚至有人提出更换候选人的想法。共和党内部则普遍认为特朗普表现强势，几乎宣告胜利，特朗普团队亦提前宣布胜绩，强调拜登无法为其政策辩护。

此次辩论不仅展现了两位政治人物的直接交锋，也映射出美国政治极化的现状，双方阵营对于辩论结果的解读截然不同。